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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
人胰腺上皮細胞
產(chǎn)品簡介：
人胰腺上皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品：KLB蛋白抗體 FGD2蛋白抗體 RRP1B蛋白抗體 人支氣管成纖維細胞 人胎盤羊膜細胞 RERF-LC-Ad1人非小細胞肺癌細胞 Calu-6 (人退行性癌細胞)
產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：284
更新時間：2024-10-30
產(chǎn)品特性Product characteristics
人胰腺上皮細胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
胰腺組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7103 |
細胞簡介：
人胰腺上皮分離自胰腺組織；胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成，胰島主要由4種細胞組成：α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β細胞分泌胰島素，降低血糖；γ細胞分泌，以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌；PP細胞分泌胰多肽，抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。胰腺干細胞在發(fā)育上被認為分離自內(nèi)胚層胰腺上皮，在隨后的胰腺發(fā)育過程中，胰腺干細胞分化為胰島細胞（α、β、δ、PP細胞）、導(dǎo)管上皮細胞以及腺泡細胞。胰腺組織中還存在大量的間充質(zhì)來源的細胞，包括成纖維細胞、血管內(nèi)皮細胞、血管平滑肌細胞以及星形細胞，其中以成纖維細胞占主要部分。要離體分離培養(yǎng)獲得胰腺上皮細胞就要排除間充質(zhì)來源的細胞，尤其是成纖維細胞。目前常用的去除成纖維細胞方法有機械刮除法、消化以及膠原酶消化法等，胰腺上皮細胞的病變與急慢性胰腺炎的發(fā)生具有重大意義。
方法簡介：
公司實驗室分離的人胰腺上皮采用膠原酶分次消化法并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的人胰腺上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔結(jié)締組織生長因子(rabbit CTGF) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
兔心肌鈣蛋白I(rabbit cTnI) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
兔心肌鈣蛋白T(rabbit c) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
兔胱抑素C(rabbit Cystatin C) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
小鼠FMS樣酪酸激酶3配體(Flt3L)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat P-selectin (omein) ELISA Kit 大鼠網(wǎng)膜素(omein)試劑盒
Humahyroopin-releasinghormone,HELISAKIT 人促甲狀腺素釋放激素(H)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCollagen-likeBioproteinⅡ,HCBⅡ試劑盒人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織Akt/PKB激酶總活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumaeceptorⅡfoheFcregionofimmunoglobulinG,FcγRⅡELISAKitGFc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)試劑盒規(guī)格：96T/48T
ATP-依賴的RNA解旋酶32抗體
分離蛋白SCRN1抗體
CDH18重組食蟹猴 CDH18 / Cadherin-18 蛋白 Protein
IL-17(Interleukin-17 0.5mgIL-17(Interleukin-17)human 白介素-17抗原(人)
IL9重組人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白 Protein
HNRNPR Protein Human 重組人 HNRNPR / HNRNP-R / HNRNP R 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
ICOS Protein Mouse 重組小鼠 ICOS / AILIM / CD278 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IL-17(Interleukin-17 0.5mgIL-17(Interleukin-17)human 白介素-17抗原(人)
HNRNPR Protein Human 重組人 HNRNPR / HNRNP-R / HNRNP R 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
CDH18重組食蟹猴 CDH18 / Cadherin-18 蛋白 Protein
ICOS Protein Mouse 重組小鼠 ICOS / AILIM / CD278 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IL9重組人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白 Protein
人胰腺上皮細胞大鼠趨化因子C-X-C-基元配體16(CXCL16)試劑盒 ，英文名： CXCL16 ELISA Kit
Mouse angiogenin (ANG) ELISA Kit 小鼠血管生長素(ANG)試劑盒
RatmammarycarcinomaMarker-CA153ELISAKit 大鼠癌標(biāo)志物-CA153試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforGSKELISAKit大鼠糖原合成酶激酶
細胞沉默調(diào)節(jié)蛋白1(SI1)活性比色法定量試劑盒20/50次
RatTumornecrosisfactorsolublereceptorⅡ,TNFsR-ⅡELISAKit大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)試劑盒規(guī)格：96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
