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基礎信息Product information
產品名稱:

小鼠脾臟單核細胞

產品簡介:

小鼠脾臟單核細胞公司正在出售的產品:人前列腺癌細胞;PC3-LUC-EGFP 角蛋白相關蛋白KAP8.1抗體 人肝動脈平滑肌細胞 紅細胞膜相關蛋白ERMAP抗體 大鼠外周血中性粒細胞 NF-kappa-B抑制子beta抗體 人腎小球內皮細胞 NDUFS8蛋白抗體

產品型號:

廠商性質:經銷商

訪問量:1894

更新時間:2024-11-07

產品特性Product characteristics

小鼠脾臟單核細胞

小鼠脾臟單核細胞

商品屬性:

組織來源

產品規(guī)格

細胞形態(tài)

貨號

脾臟

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

巨噬細胞樣

YS-01X8521

細胞簡介:

小鼠脾臟單核分離自脾臟組織;脾臟是機體大的免疫器官,占全身淋巴組織總量的25%,含有大量的淋巴細胞和巨噬細胞,是機體細胞免疫和體液免疫的中心。位于左季肋區(qū)后外方肋弓深處,與911肋相對,長軸與第10肋一致。膈面與膈肌和左肋膈竇相鄰,前方有胃,后方與左腎、左腎上腺毗鄰,下端與結腸脾溝相鄰,地柔軟的網狀內皮細胞器官。單核細胞(monocytes)是體積大的白細胞。其細胞核常偏位,呈多形性,如卵圓形、腎形(a)、馬蹄形(b)、不規(guī)則形(c)等,常有折疊感(c);染色質呈疏松網狀,著色較淺。胞質較多,嗜堿性,但因含大量細小的嗜天青顆粒而染成灰藍色,顆粒含過氧化物酶。單核細胞是血液中大的血細胞。目前認為它是巨噬細胞的前身,具有明顯的變形運動,能吞噬、清除受傷、衰老的細胞及其碎片。單核細胞還參與免疫反應,在吞噬抗原后將所攜帶的抗原決定簇轉交給淋巴細胞,誘導淋巴細胞的特異性免性反應。單核細胞也是對付細胞內致病細菌和寄生蟲的主要細胞防衛(wèi)系統(tǒng),還具有識別和殺傷腫瘤細胞的能力。淋巴細胞則為具有特異性免疫功能的細胞。T淋巴細胞主要參與細胞免疫反應而B淋巴細胞參與體液免疫反應。

原代細胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>

  7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。

  二、懸浮細胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;

  3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

  5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。

方法簡介:

實驗室分離的小鼠脾臟單核采用密度梯度離心法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測:

實驗室分離的小鼠脾臟單核經CD14免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基:含FBSM-CSF、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:半貼壁半懸浮

細胞形態(tài):巨噬細胞樣

傳代特性:不增殖;不傳代

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

小鼠脾臟單核體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

小鼠脾臟單核細胞

細胞傳代及凍存:

細胞傳代步驟細胞凍存步驟
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

小鼠脾臟單核細胞


公司正在出售的產品:

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腫瘤血管內皮標志物/G蛋白偶聯(lián)受體124抗體

γ2肌動蛋白抗體

IL23重組大鼠 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein

CR (Calretinin 0.5mgCR (Calretinin) 鈣結合蛋白(抗原)

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CR (Calretinin 0.5mgCR (Calretinin) 鈣結合蛋白(抗原)

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MME重組人 CD10 / Neprilysin / MME 蛋白 Protein

豚鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)試劑盒 ,英文名: MCP-4/CCL13 ELISA Kit

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小鼠脾臟單核細胞小鼠缺血修飾白蛋白(IMA)ELISA 試劑盒

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