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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

大鼠胚成纖維細胞

產(chǎn)品簡介:

大鼠胚成纖維細胞公司正在出售的產(chǎn)品:金屬磷酸酯酶1抗體 D341Med(人髓母細胞瘤細胞) 兔前列腺上皮細胞 肝癌衍生生長因子相關(guān)蛋白3抗體 小鼠睪丸支持細胞 類固醇脫氫酶樣蛋白1抗體 人心肌成纖維細胞 磷酸化細胞分化周期蛋白37抗體

產(chǎn)品型號:

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:1038

更新時間:2024-11-05

產(chǎn)品特性Product characteristics

大鼠胚成纖維細胞

大鼠胚成纖維細胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細胞形態(tài)

貨號

胚胎

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

成纖維細胞樣

YS-01X8247

細胞簡介:

大鼠胚成纖維分離自胚胎;成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的胚胎成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細胞常用作ES細胞培養(yǎng)常用的飼養(yǎng)層細胞,能產(chǎn)生抑制ES細胞自主分化和促進ES細胞增殖的因子,故能有效地促進ES細胞的增殖并維持其未分化特性和多潛能性,且分泌效果優(yōu)于外源添加的一些因子,而且可以為ES細胞的培養(yǎng)提供類似于體內(nèi)的微環(huán)境,故在研究哺乳動物ES細胞中得到廣泛使用。

原代細胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;

  3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

  5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。

方法簡介:

實驗室分離的大鼠胚成纖維采用消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

實驗室分離的大鼠胚成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基:含FBS、bFGF、Insulin、PenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細胞形態(tài):成纖維細胞樣

傳代特性:可傳3代左右

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%CO2,5%

大鼠胚成纖維體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。

大鼠胚成纖維細胞

細胞傳代及凍存:

細胞傳代步驟細胞凍存步驟
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

  ③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

大鼠胚成纖維細胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠雌激素(E)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1 (sPECAM-1/sCD31) ELISA Kit 大鼠可溶性血小板內(nèi)皮細胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)試劑盒

HumanureaserelatedproteinC,UreCELISAKit 人尿素酶相關(guān)蛋白C(UreC)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-insulieceptoraibody,AIRA試劑盒人抗胰島素受體抗體(AIRA)試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物莽草酸脫氫酶(shikimatedehydrogenase;SkDH)電泳分析試劑盒5

HumanVascularEndothelialcellGrowthFactorD,VEGF-DELISAKit人血管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)試劑盒規(guī)格:96T/48T

5-三磷酸肌醇受體3抗體

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體

B2M重組大鼠 B2M / Beta-2-microglobulin 蛋白 Protein

GSR/GRase(glutathione reductase 0.5mgGSR/GRase(glutathione reductase) 還原酶抗原

S100A10重組人 S100A10 蛋白 Protein

EPHB2 Protein Human 重組人 EphB2 / Hek5 蛋白 (aa 570-987, His & GST 標簽)

UCHL1 Protein Mouse 重組小鼠 UCHL1 / PGP9.5 蛋白

GSR/GRase(glutathione reductase 0.5mgGSR/GRase(glutathione reductase) 還原酶抗原

EPHB2 Protein Human 重組人 EphB2 / Hek5 蛋白 (aa 570-987, His & GST 標簽)

B2M重組大鼠 B2M / Beta-2-microglobulin 蛋白 Protein

UCHL1 Protein Mouse 重組小鼠 UCHL1 / PGP9.5 蛋白

S100A10重組人 S100A10 蛋白 Protein

大鼠胚成纖維細胞大鼠白介素6受體(IL-6R)試劑盒 ,英文名: IL-6R ELISA Kit

Mouse ierleukin 18 (IL-18) ELISA Kit 小鼠白介素18(IL-18)試劑盒

ELISA 小鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(mouse HIF-1α)  進口分裝

CLIAKitforINS(MouseInsulin)ELISAKit小鼠胰島素

通用型腐霉屬種(Pythiumspecies)試劑盒20

ELISAKitITGαM/CD11b大鼠整合素αM


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